建立潔凈度（沉降菌）的磨煉限度安全操作規程，為沉降菌查驗員工給予精確的限度實際操作方法。
2局限性
適用本企業潔凈度（沉降菌）查驗的全過程。
3義務
QA對本規程的有效實行擔負監控查驗義務，QC對本規程的推行用心。
4程序流程
4.1簡述：本限度對
無塵車間細顆粒物及微生物菌種環境污染劃分需舉辦自然環境操縱的屋子或地區。其建造構造、武器裝備以及應用均具備減少對該地域內污染物的干預、產生和停留的作用。
4.2測試方法
4.2.1方法摘要：
本限度按我國技藝監控局公布的《醫藥工業潔凈室（區）沉降菌的測試方式》，接受地基沉降法，即利用當然地基沉降基本原理互聯網在空氣中的微生物物體于培養基平皿，經多個時間，在適宜的前提下讓其滋長到可以看到的菌體舉辦記數，以平板電腦培養皿中的菌體數來分辨清潔自然環境內的活微生物菌種數，并借此來鑒定潔凈室（區）的潔凈度。
4.2.2儀器設備
儀器設備包含：培養皿、培育基、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌器。
4.2.2.1培養皿
一樣通常接受f90mm×15mm規格型號的培養皿。
4.2.2.2培養基
黃豆酪胚盤瓊脂培養基（TSA）或沙氏培育基（SDA）或客戶認同并簡歷證了的培養基。
4.3測試前的標準：
4.3.1測試情況；
4.3.1.1沉降菌測試前，被測試潔凈室（區）的溫濕度記錄須抵達劃分的規定，負壓差、換風次數、空氣流速務必操縱在劃分值內。潔凈室（區）的溫度和空氣濕度應與其說生產制造及加工工藝規定相切合（無特別要求時，溫度在18℃～26℃，空氣濕度在45%～65%中間為宜），與此同時應滿足測試儀器設備的應用局限性。
4.3.1.2沉降菌測試前，被測試潔凈室（區）早已由消毒殺菌。
4.3.1.3測試情況有靜止和信息二種，測試情況的選用務必相符合生產制造的規定，并在敘述中標明測試情況。
4.3.1.4靜態數據測試時，培養皿外露時間為30min以上；動態性測試時，培養皿外露時間為不得超過4h。
4.3.2測試員工：
4.3.2.1測試員工務必衣著相符合自然環境潔凈度級其他事兒服。
4.3.2.2靜態數據測試時，房間內測試員工不可超過2人。
4.3.3測試時間：
4.3.3.1對單邊流，如100級凈化屋子及層.流事兒臺，測試應在凈化空調機組正
常運作不少于10min后最開始。
4.3.3.2對非單方面流，如B級、B級以上的凈化屋子，測試應在凈化空調機組正常的運作不少于30min后最開始。
4.3.4重視事宜：
4.3.4.1測試用品要作殺菌處理，以保證測試的穩定性、精確性。
4.3.4.2接受一切對策避免人為因素對樣版的環境污染。
4.3.4.3對培養基、培育標準以及他主要參數作詳盡的記錄。
4.3.4.4因為病菌品種繁多，差別甚大，記數時一樣平時用電子散射光于培養皿后面或正臉細心調查，不必漏計培養皿邊沿生長發育的菌體，并須重視細菌菌落與培養基沉淀的差別，必須時要高倍顯微鏡辨別。
4.3.4.5取樣前要認真仔細每一個培養皿的品質，如發覺質變、損壞或環境污染的應去除。
4.3.4.6針對單邊流潔凈室（區）或正壓送風口，采樣器取樣口房屋朝向應正對著氣旋偏重；針對非單方面流潔凈室（區），取樣口往上。
4.3.4.7布署取樣點時，最少應只要繞開細顆粒物較密集的回風管道；取樣時，測試員工應立在取樣口的低處側，并只要少行走。
4.3.4.8培養皿在用以檢驗時，為阻攔培養皿運送或挪動過程導致的危害，宜與此同時舉辦對比實驗，每一次或各個地區取1個對比皿，與取樣皿同法實際操作但不需外露取樣，隨后與采集后的培養皿（TSA或SDA）一起放進培養箱里培養，實際效果應無菌檢測落生長發育。
4.4測試流程：
4.4.1取樣方法：
4.4.1.1儀器設備和用品：培養皿。
4.4.1.2方法：
a取樣點一樣平時在離路面0.8m相對高度的水準表面均值布署。
b取樣點超過5點時，還可以在離路面0.8m～1.5m相對高度的范圍內分層次布署，但各層不少于5點。
c開啟培養皿蓋，使培育基外邊外露0.5h，再將培養皿蓋上蓋子之后顛倒。
至少取樣點數量
總面積
（m2）
潔凈度等級
總面積
（m2）
潔凈度等級
注：表格中的總面積，針對單邊流潔凈室，就是指正壓送風口總面積。針對非單方面流潔凈室就是指臥室的總面積。
至少培養皿數
潔凈度等級
所需φ90mm培養皿數（地基沉降0.5h計）
4.4.2培養：
4.4.2.1儀器設備和用品：培養箱、天平秤（萬分之一）、稱重紙、錐形瓶（1000ml、150ml）、容量瓶（1000ml）、高壓蒸汽滅菌鍋。
4.4.2.2培養基：
4.4.2.2.1黃豆酪胚盤瓊脂培養基（TSA）：
a）要素：酪胚盤胰酶消化吸收物15g大豆粉番木瓜胚盤酶消化吸收物5g氧化鈉5g瓊脂15g純水系統1000ml
b）制作方法：取以上要素除瓊脂，參雜，發燙消溶，調理pH值使殺菌后為7.3±0.2，添加瓊脂，加溫融化后，散裝，殺菌，制冷至約60℃，在無菌技術規定下竭盡約20ml至無菌檢測培養皿（f90mm）中。加蓋后在室內溫度放入凝結。
4.4.2.2.2沙氏培養基（SDA）：
a）葡萄糖水40g酪胚盤胰酶消化吸收物、動物組織的胃酶消化物相等參雜10g瓊脂15g純水系統1000ml
b）制作方法：取以上要素除瓊脂，參雜，發燙消溶，調理pH值使殺菌后為5.6±0.2，添加瓊脂，加溫融化后，散裝，殺菌，制冷至約60℃，在無菌技術規定下竭盡約20ml至無菌檢測培養皿（f90mm）中。加蓋后在室內溫度放入凝結。
4.4.2.3方法：全部取樣竣事后，將培養皿倒放置恒溫培養箱中培育，接受黃豆酪胚盤瓊脂培養基（TSA）配置的培養皿在30～35℃培育箱中培養，時間不少于2天；接受沙氏培養基（SDA）配置的培養皿在20～25℃培育箱中培養，時間不少于5天。每次培養基應該有對比實驗，磨煉培養基自身是不是環境污染。可每次選中3只培養皿作對比培養。
4.4.3菌落計數：
4.4.3.1用人眼立即記數，標記或在菌落計數器上點計，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗，有無忽略。
4.4.3.2若培養皿上面有2個或2個以上的菌體重合，可辨別時仍以2個或2個以上菌落計數。
4.4.4實際效果籌算：
4.4.4.1用記數方法得到每個培養皿的菌體數。
4.4.4.2均值菌體數的籌算，見式。
M1M2…Mn
均值菌體數M=
n
式中M―均值菌體數；
M1―1號培養皿菌體數；
M2―2號培養皿菌體數；
Mn―n號培養皿菌體數；
n―培養皿數量。
4.4.5實際效果鑒定：
4.4.5.1潔凈室（區）內的均值菌體數務必小于所選中的鑒定限度。
4.4.5.2在靜態數據測試時，若某潔凈室（區）內的沉降菌均值菌體數超越鑒定限度，則務必對于此事地區先舉辦消毒殺菌，隨后再次取樣2次，測試實際效果均須及格。
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